[별표10] 단회투여흡입독성시험

① 시험동물

1. 원칙적으로 랫드를 사용하고 그 외의 사유가 있는 경우 포유동물 중에서   선택하여 사용할 수 있다.

2. 동물수는 각 군당 10마리(암․수 각각 5마리) 이상으로 하고, 시험당시 임  신하였거나 임신경력이 있는 암컷은 사용하지 않는다.

② 시험방법

1. 시험물질의 투여농도

가. 최소한 세 가지 이상의 농도를 사용하고,

나. 사용할 각 농도는 예비시험을 통하여 결정하거나

다. 가장 높은 농도는 LC50값보다는 높지만 100% 치사율을 발휘하지 않는 농도를 취하고

라. 중간농도는 LC50값 부근,

마. 가장 낮은 농도는 LC50값 보다 낮고 전혀 치사를 가져오지 않는 농도보다는 높은 농도를 취한다.

2. 대조군

비투여군 및 용매투여군 등으로 한다.

3. 시험물질 투여 방법

가. 흡입챔버(exposure chamber)를 사용하여 동물을 챔버속에 넣어 시험하거나 머리 부분만 챔버안에 넣어 시험한다.

나. 선정된 농도의 시험물질을 공기와 섞어 챔버안에 주입시키고, 이때 챔버내의 공기유통은 시간당 12～15회 정도가 되도록 공기주입 속도를 조절한다. 또한 산소의 비율은 19%, 온도는 22±3˚C, 습도는 30-70%로 유지하여야 한다.

다. 동물을 챔버에 넣어 시험하는 경우 한 마리씩 따로 사육케이지에 넣어 시험하는 것이 적합하며, 동물이 차지하는 공간은 챔버전체 공간의 5%이내가 되어야 한다.

라. 투여시간은 챔버안의 시험물질 농도가 균일하게 된 후 4～6시간으로 단회 투여한다.

마. 투여기간동안 챔버내 공기의 주입속도, 온도, 습도를 매 30분마다 기록하고 공기중 시험물질의 실제 농도는 가능하면 연속적으로 측정하되 최소한 시작과 끝, 그리고 중간에 측정하고, 분무제의 경우 입자크기의 분포를 시작과 끝, 그리고 중간에 각각 측정하여야 한다.

③ 관찰

1. 관찰기간

14일로 하고 동물을 사육하면서 다음과 같은 시험 및 관찰을 한다.

가. 체중은 시험직전과 시험종료시 측정하고 시험기간 중에는 일주일 간격으로 측정한다.

나. 일반적 독성증세로서 피부, 모피, 안구, 점막, 호흡기계, 순환계, 자율신경계 및 중추신경계, 운동 및 행동양식, 진전, 경련, 타액분비, 설사, 기면, 수면과 혼수상태 등을 사육상자 옆에서 매일 관찰한다.  증세가 나타날 경우 증세, 발병시간, 정도, 지속시간을 기록한다.  관찰기간 중 사망한 동물은 부검하기 위해 냉동시키고, 쇠약한 동물은 따로 격리한다.

다. 사망동물 및 관찰기간이 끝난 생존 동물에 대하여는 부검, 육안적 관찰을  실시하고 생존 동물 중 이상이 발견된 장기․조직에 대하여는 필요시 병리조직학적 검사를 실시한다.

2. 시험결과의 기록

LC50값과 이의 95% 신뢰도 범위로써 표현하며 일반독성 증세 및 병리조직학적 시험결과를 기록한다.