(별표 3) 참돔이리도바이러스병 (Red sea bream iridoviral disease, RSIVD) 정밀검사법

가) 병원체 : Red sea bream iridovirus (RSIV), Infectious spleen and kidney necrosis virus (ISKNV)

나) 임상증상

(1) 외부증상

- 심한 빈혈, 아가미 점상출혈

(2) 해부학적 증상

- 아가미 빈혈, 비장 비대

(3) 병리조직학적 변화

- 신장, 비장, 심장, 장에서 비정상적으로 비대된 세포 관찰

다) 정밀검사

(1) 시료 : 감염어의 비장을 포함한 조직 (신장, 비장)

(2) PCR primer sets : protocol 1 & 2 모두 실시

- Protocol 1 : amplify both RSIV and ISKNV DNA

- Protocol 2 : amplify only RSIV DNA

		PCR primers	Product size
Protocol 1	1-Forward	5'-CTCAAACACTCTGGCTCATC-3'	570bp
	1-Reverse	5'-GCACCAACACATCTCCTATC-3'
Protocol 2	4-Forward	5'-CGGGGGCAATGACGACTACA-3'	568bp
	4-Reverse	5'-CCGCCTGTGCCTTTTCTGGA-3'

(3) PCR conditions

- [30 cycles]  94°C for 30s, 58°C for 1min, 72°C for 1min

- [1 cycle]    72°C for 5min

라) 확정진단

(1) 염기서열분석 : PCR 산물의 염기서열분석을 실시하여 RSIV임을 확인

(2) 결과판정 : RSIV 및 ISKNV 염기서열과 일치하면 양성으로 판정