(별표 4) 잉어봄바이러스병 (Spring viraemia of carp, SVC) 정밀검사법

가) 병원체 : Spring viraemia of carp virus (SVCV)

나) 임상증상

(1) 외부증상

- 체색흑화, 평형감각 상실, 안구돌출, 아가미창백, 체표출혈, 지느러미 기저부 출혈, 복부팽만, 돌출된 항문에 배설물을 달고 다님

(2) 해부학적 증상

- 복수, 새판 변성, 장의 염증 및 출혈, 근육․지방조직․부레의 국소적 출혈

(3) 병리조직학적 증상

- 간의 부종성 염증 및 괴사, 심막염, 심막근의 국소변성 및 괴사, 비장 세망내피계의 증생 및 울혈, 췌장의 염증

다) 정밀검사

(1) 시료 : 세포배양 상층액 또는 감염조직 (신장, 비장, 뇌)

(2) PCR primer sets : Nested PCR 실시

		PCR primers	Product size
First	Forward 1	5'-TCTTGGAGCCAAATAGCTCARRTC-3'	714bp
	Reverse 2※	5'-AGATGGTATGGACCCCAATACATHACNCAY-3'
Nested	Forward 1	5'-TCTTGGAGCCAAATAGCTCARRTC-3'	606bp
	Reverse 4	5'-CTGGGGTTTCCNCCTCAAAGYTGY-3'

※ Reverse transcription (RT) : Reverse 2 primer 사용

※ Mixed base codes : R(AG), Y(CT), M(AC), K(GT), S(GC), W(AT), H(ACT), B(GCT), V(AGC), D(AGT), N(AGCT)

(3) PCR conditions

- RT : 37°C for 1hr

- [35 cycles]  95°C for 1min, 55°C for 1min, 72°C for 1min

- [1 cycle]    72°C for 10min

라) 확정진단

(1) 염기서열분석 : PCR 산물의 염기서열분석을 하여 SVCV 임을 확인

(2) 결과판정 : SVCV 염기서열과 일치하면 양성으로 판정