[별표 7]

생식용생굴 세균수의 측정법 및 E.coli 최확수의 측정법

1. 검체의 채취 및 시료의 조제

○ 탈각하여 판매되는 굴에 대해서는 200g이상을 멸균기구를 사용하여 멸균용기에 채취하여 이것을 검체로 한다.

○ 탈각하지 않은 채로 판매되는 굴에 대해서는 패각을 알코올천으로 소독한 후 멸균 기구를 이용하여 패각을 제거한 후에 패즙을 포함하여 200g이상을 멸균용기에 채취하여 이것을 검체로 한다.

○ 다음으로 검체를 멸균호모게나이저컵으로 옮긴 후 인산완충희석수를 첨가하여 세절하여 이것을 시료원액으로 한다.

○ 다음으로 시료원액20ml에 인산완충희석수 80ml을 가하여 검체의 10배희석액을, 또한 이 10배희석액 10ml에 인산완충희석수90ml을 첨가하여 검체100배 희석액을 만들어 시료로 한다. 이외 필요에 따라서는 100배희석액의 제작방법에 준하여 검체의 단계희석액을 제작하여 시료로 한다.

○ 인산완충희석수 - 인산1칼륨(무수)34g을 500ml의 정제수에 녹여서 이것에 약 1mol/L 수산화나트륨용액 약175ml을 첨가하고  pH를 7.2로 조절하고 여기에 정제수를 추가하여 전량을 1,000ml로 맞춘 것을 원액으로 한다. 이 원액 1.25ml에 정제수를 추가하여 1,000ml로 하여 고압증기멸균을 한다.

2. 세균수(생균수)의 측정법

○ 조제한 시료중 1평판에 30에서 300개까지의 집락이 얻어지는 희석액을 선택하여 제1식품부 D 각조 각항 ○ 빙설 1 빙설의 성분규격 (2)의 2에 준하여 측정한다.

3. E.coli최확수의 산정법

○ 시료원액 2ml, 10배희석액 1ml 및 100배희석액 1ml을 각각 5개의 EC 발효관에 접종하고 항온수조를 사용하여 44.5℃(상하 0.2℃의 오차를 인정)에서 24시간( 전후 2시간의 여유를 인정)배양한다. 이때 가스발생이 인정된 시료원액이나 시료는 E.coli 양성으로 한다. 검체100g에 대한 E.coli최확수는 E.C.발효관에 접종된 이것의 시료원액이나 시료중 E.coli양성을 나타낸 것을 접종한 EC 발효관의 수에 대하여 다음의 표 (이하 ‘최확수표’라 한다)에 따라 산출된 계수를 10배로 한다.

○ E.C. 발효관 - 펩톤 20.0g, 유당5.0g, 담즙산염 1.5g, 인산2칼륨(무수) 4.0g, 인산 1칼륨(무수) 1.5g 및 식염 5.0g을 1,000ml의 정제수에 녹인다. 이것을 발효관에 분주하여 고압살균한 후 빠르게 냉각시킨다. 최후 pH는 6.8～7.0이어야 한다.