(별표 8) 퍼킨수스감염증 (Infection with Perkinsus marinus) 정밀검사법

가) 병원체 : Perkinsus marinus

나) 임상증상

(1) 해부학적 증상

- 소화선이 창백해지고 조직이 얇고 엷어짐

(2) 병리조직학적 증상

- 장 상피 및 여러 기관의 결합조직에서 P. marinus cell이 관찰됨

- haemocyte 침윤과 식작용 관찰, 중감염시 장 상피가 완전히 파괴되기도 함

다) 정밀검사

(1) 시료 : 살아있거나 신선한 (freshly dead) 조직 (아가미, 맨틀)

(2) PCR primer sets : protocol 1 & 2 모두 실시

		PCR primers	Product size
Protocol 1	PerkITS-85	5`-CCGCTTTGTTTGGATCCC-3`	703bp
	PerkITS-750	5`-ACATCAGGCCTTCTAATGATG-3`
Protocol 2	PmarITS-70F	5`-CCTTTGYTWGAGWGTTGCCAGATG-3`	509bp
	PmarITS600R	5`-CGAGTTTGCGAGTACCTGKAGAG-3`

(3) PCR conditions

	PCR condition	Cycles
Protocol 1	95°C for 4min 95°C for 1min, 55°C for 1min, 65°C for 3min 65°C for 5min	1 40 1
Protocol 2	95°C for 4min 94°C for 1min, 57°C for 1min, 65°C for 3min 65°C for 10min	1 40 1

라) 확정진단

(1) 염기서열분석 : PCR 산물의 염기서열분석을 통해 P. marinus 임을 확인

(2) 결과판정 : P. marinus 염기서열과 일치하면 양성으로 판정