생식용 생굴 대일수출 요령

(해양수산부고시 제2003-140호, 2013.5.31)

제1조(목적) 이 요령은 농수산물품질관리법 제69조의 규정에 의하여 대일 수출을 목적으로 하는 생식용 생굴의 양식장 환경·가공 및 위생 등의 관리 기준 설정과 가공 시설의 등록, 제품검사 등 제반사항을 규정함을 목적으로 한다.

제2조(정의) 이 요령에서 사용하는 용어의 정의는 다음과 같다.

1. "생식용 생굴"이라 함은 일본과 교역될 모든 생식용 활굴(착각굴), 생반각굴, 생알굴을 말한다.

2. "등록자"라 함은 일본지역으로 수출하기 위하여 생식용 생굴을 처리 가공하고자 제3조의 규정에 의하여 국립수산물품질관리원장(이하 "원장"이라 한다)에게 가공시설을 등록한 자를 말한다.

3. "가공시설"이라 함은 생식용 생굴을 처리·가공하는데 필요한 모든 시설과 장비를 말한다.

4. "지정해역"이라 함은 농수산물품질관리법 제71조(지정해역의 지정)에 의하여 해양수산부장관이 지정 고시한 해역을 말한다.

제3조(가공시설의 신청 및 등록) ① 대일수출용 생식용 생굴을 처리·가공 하고자 하는 자는 별지 제1호서식에 의한 신청서를 국립수산물품질관리원 지원장(이하 "지원장"이라 한다)을 거쳐 원장에게 제출하여야 한다.

② 지원장은 제1항의 신청서를 접수하였을 때에는 별표 1 내지 별표 3의 기준에 적합 여부를 별지 제2호서식의 점검표에 의거 점검하고, 그 점검결과를 별지 제3호 서식의 실태조사서와 지원장 의견서를 첨부하여 원장에게 통보하여야 한다.

③ 원장은 지원장으로부터 통보 받은 신청서를 검토하여 적합한 경우 별지 제4호 서식의 등록증을 교부하고 해양수산부장관에게 보고하여야 한다.

④ 등록자가 등록 내용의 변경 또는 휴·폐업을 하고자 할 때에는 별지 제5호서식에 의하여 원장에게 신고하여야 하며, 원장은 등록내용 변경신고의 경우에는 이를 제1항 내지 제3항의 규정에 따라 처리하여야 한다.

제4조(시설 및 가공처리) ① 대일수출 생식용 생굴을 가공·처리할 수 있는 자는 제3조의 규정에 의하여 가공시설을 원장에게 등록한 자로서 별표 2 및 별표 3에 적합한 기준을 갖추어야 한다.

② 생식용 생굴은 제2조제4호의 지정해역에서 생산, 채취된 것에 한하여 별표 1의 기준에 따라 가공·처리하여야 한다.

제5조(자체검사 등) ① 등록자가 생식용 생굴을 가공처리시설에서 처리  하고자 할 때에는 별표 4의 항목에 대하여 자체 검사를 하여야 하며 별표 5의 품질기준에 따라 제품의 품질을 관리하여야 한다.

② 등록자는 제1항의 규정에 의한 제품검사를 지원장에게 신청할 수 있다.

③ 등록자는 제1항의 규정에 의한 자체검사 결과를 기록·유지하여야 하며, 검사원의 요구가 있을 때에는 이를 제시하여야 한다.

④ 별표 5의 품질기준 중 생균수 및 분변계 대장균은 별표 7의 시험법에 따라 시험한다.

제6조(생산단위별 관리) ① 등록자는 생식용 생굴의 채취·운반·가공 및 수출에 이르기까지 별지 제6호서식에 의한 생산단위별관리(이하 "롯트관리"라 한다)를 하여야 한다.

② 원장은 롯트관리를 효율적으로 이행하도록 하기 위하여 별도의 세부요령을 정하여 시행할 수 있다.

제7조(원산지증명서) 생식용 생굴의 원산지증명서를 발급받고자 하는 자는 별지 제6호 서식에 의한 롯트관리기록표 사본 1부와  별지 제7호서식의 원산지증명서에 굴수하식수산업협동조합장(이하 "굴수협조합장"이라 한다)의 확인을 받아 지원장에게 제출하여야 하며, 지원장은 이를 확인 후 발급 하여야 한다.

제8조(위생점검 등) ① 원장은 매년 굴 채취시기를 고려하여 가공시설 점검 등에 관한 종합계획을 수립하고, 이를 지원장에게 통보하여야 한다.

② 제1항의 통보를 받은 지원장은 등록자에게 점검실시 1개월전에 통보하고, 별지 제2호 서식에 의한 종합점검을 실시하여야 하며, 시설기준이나 위생기준에 미비한 사항이 있을 때에는 일정 기한을 정하여 보완토록 하여야 한다.

③ 지원장은 제2항에 의한 점검결과를 15일내에 원장에게 보고하여야 하며, 원장은 각 지원장으로부터 보고 받은 점검 결과를 종합하여 1개월 내에 해양수산부장관에게 보고하여야 한다.

④ 지원장이 필요하다고 인정할 때에는 등록된 가공시설에 대한 위생관리 상태와 제품에 대한 모니터링 검사를 실시할 수 있다.

⑤ 해양수산부장관은 관계기관과 합동으로 특별점검이 필요하다고 판단될 경우 점검실시 1개월전까지 계획을 수립, 등록자 및 관계기관에 통보한 다음 실시할 수 있다

제8조의1(이질균조사) ① 지원장은 생식용 생굴 생산시기(9월~ 익년 3월까지)에 전제품(원료굴, 가공제품, 사용수)마다 별표 8의 이질균 시험법에 의거 이질균 모니터링 검사를 실시하여야 한다.

② 지원장은 모니터링결과 이질균이 검출된 경우 원인이 규명되어 안전성이 확보될 때까지 원산지증명서 발급을 중단 할 수 있다.

③ 지원장은 제1항에 의한 모니터링 조사결과를 월2회(15일, 30일) 해양수산부장관에게 보고하고, 해양수산부장관은 동 결과를 일본의 후생노동성에 통보한다. 이경우 이질균이 검출되었을 경우 지원장은 해양수산부장관에게 지체없이 보고하고, 해양수산부장관은 즉시 후생노동성에 통보한다.

제9조(지정해역의 관리) ① 국립수산과학원장(이하 "과학원장"이라 한다)은 제2조제4호의 지정해역의 관리를 위하여 수질 및 패류에 대한 위생조사를 별표 6의 해역의 위생관리 기준에 따라 실시하고, 이질균(불검출)에 대하여는 지정해역 제Ⅰ∼Ⅳ호 해역의 패류위생조사지점을 대상으로 별표 8의 이질균 시험법에 의거 월1회이상 조사하여야 한다.

② 제1항의 규정에 의한 지정해역의 위생조사는 월 1회이상 실시하며, 그 결과를 해양수산부장관에게 년 1회 보고하여야 한다.

③ 과학원장은 제1항의 규정에 의한 수질 및 패류에 대한 위생조사를 실시하고자 할 때에는 조사의 객관성과 오염상태의 대표성 및 연속성을 확보할 수 있도록 조사항목, 각 시료의 채취지점 및 시기 등 종합적인 조사계획을 수립한 후 실시하여야 한다.

제10조(해수기준초과시 특별관리) ① 과학원장은 제9조제1항의 규정에 의한 지정해역의 위생조사 결과 수질기준(분변계대장균)에 부합되지 않는 해역이 있는 경우에는 그 영향을 받는 해역의 범위를 정하여 그 내용을 원장과 굴수협조합장에게 지체없이 통보 하여야 하며, 통보를 받은 굴수협조합장은 제3조의 규정에 의한 등록자 및 생산자에게 즉시 통보하여야 한다.

② 제1항의 규정에 의한 통보를 받은 원장과 굴수협조합장은 해당 해역의 양식장 에서 채취된 제품에 대하여 과학원장으로부터 지정해역의 해수 위생조사 결과가 해수기준에 적합하다는 통보를 받을 때까지 원산지증명서의 발급 또는 확인을 중지하여야 한다.

제11조(패독기준초과시 패독관리) ① 과학원장은 제9조제1항의 규정에 의한 위생조사결과 패독기준(마비성패독: 80 ㎍/100g, 설사성패독 0.05 MU/g, 기억상실성 패독 20ppm)을 초과하는 해역이 있을 경우에는 그 영향을 받는 해역의 범위를 정하여 그 내용을 원장과 굴수협조합장에게 지체없이 통보하여야 하며, 굴수협조합장은 제3조의 규정에 의한 등록자 및 생산자에게 즉시 통보하여야 한다.

② 과학원장은 제1항에서 규정한 사항이 발생된 경우 패류독소가 패독  기준에 적합할 때까지 주 1회이상 패류독소 검사를 실시하고 그 결과를 원장 및 굴수협조합장에게 통보하여야 한다.

③ 제1항의 규정에 의한 통보를 받은 원장과 굴수협조합장은 해당 해역의 양식장에서 채취된 제품에 대하여 과학원장으로부터 패류독소가 패독기준에 적합하다는 통보를 받을 때까지 원산지증명서의 발급 또는 확인을 중지하여야 한다.

제12조(취소) 원장은 등록자가 다음 각 호의 1에 해당하는 경우에는 경고조치 및 원산지증명서 발급중지를 하고, 재위반시에는 등록을 취소할 수 있다.

1. 제8조의 규정에 의하여 실시하는 종합점검, 모니터링 검사를 거부  하거나, 시설 및 위생보완사항을 이행하지 아니할 경우

2. 등록자가 준수하여야 할 제4조 및 제5조의 의무사항을 이행하지 아니할 경우

제13조(청문) 원장은 제12조의 규정에 의한 등록취소처분을 하고자 하는 경우에는 청문을 실시하여야 한다.

제14조(기타) 원장은 한·일 생식용 생굴수출을 위한 협의사항을 효율적으로 이행하기 위하여 별지 제2호서식중 필수항목의 지정 등 세부실시요령을 정하여 시행할 수 있다.

부    칙  <제2009-294호, 2009. 8.25>

① (시행일) 이 고시는 2009년 8월 25일부터 시행한다.

② (재검토 기한) 이 고시는 2012년 8월 24일까지 “훈령ㆍ예규 등의 발령 및 관리에 관한 규정(대통령훈령 제248호)” 제7조제3항제2호에 따라 재검토하여야 한다.

부     칙  <제2011-94호, 2011.6.15>

① (시행일) 이 고시는 2011년6월15일부터 시행한다.

② (재검토 기한) 이 고시는 2014년6월14일까지 “훈령․예규 등의 발령 및 관리에 관한 규정(대통령훈령 제248호)” 제7조제3항제2호에 따라 재검토하여야 한다.

부     칙  <제2013-140호, 2013. 5. 31  >

① (시행일) 이 고시는 2013년 5월 31일부터 시행한다.

② (재검토기한) 「훈령ㆍ예규 등의 발령 및 관리에 관한 규정」(대통령훈령 제248호)에 따라 이 고시 발령 후의 법령이나 현실여건의 변화 등을 검토하여 이 고시의 폐지, 개정 등의 조치를 해야 하는 기한은 2016년 5월 30일까지로 한다.

[별표 1]

채취 및 가공처리 기준

1. 원료용굴은 해수 100ml당 대장균최확수가 70이하의 해역에서 채취된 것이거나 또는 그 이외의 해역에서 채취된 것으로 100ml당 최확수가 70이하의 해수 또는 염분농도 3%이하의 해수를 사용하여 즉시 환수하거나 또는 살균하면서 정화한 것이어야 한다.

○ 해수의 대장균군최확수의 측정법 - 검체로서 채취한 해수 10ml을 5개의 배농도유당부이온 발효관에, 1ml을 5개의 유당부이온발효관에, 0.1ml을 5개의 유당부이온발효관에 각각 접종하여 35℃(±1.0℃의 여유를 인정)에서 배양한다. 24시간후(±2시간의 여유를 인정) 또는 48시간후(±3시간의 여유를 인정, 이하의 목에 있어서 동일)에 가스발생이 인정된 해수는 대장균군측정시험양성으로 바로 다음을 측정시험을 행한다.

○ 대장균군 측정 시험양성의 해수는 접종한 배농도유당부이온 발효관 또는 유당부이온 발효관의 접종액을 직경 3mm의 백금이로 B.G.L.B. 발효관에 1백금이 이식한다 이것을 35℃(± 1.0℃의 여유를 인정)에서 48시간 배양한다. 이 경우 가스발생이 인정된 해수는 대장균군 측정 시험양성으로 한다. 검체 100ml에 대한 대장균군 최확수는 검체로써 채취한 해수중 대장균군 측정 시험양성을 나타낸 해수를 접종한 배농도유당부이온 발효관의 수에 대하여 최확수표에 따라 산출된 계수로 한다. 이 경우 해당표 중 ｢검체인 해수 10ml｣과 ｢검체 10배 희석액｣ 또는 ｢검체인 해수 1ml｣과 ｢검체 100배 희석액｣ 또는 ｢검체인 해수 0.1ml｣로 한다.

2. 원료용 굴을 일시 수중에서 저장하는경우에는 100ml당 대장균군 최확수가 70이하인 해수 또는 염분농도 3%인 인공염수를 사용하여 수시로 바꾸어 주거나 살균해가면서 저장하여야한다.

3. 원료용 굴은 수확한 후 신속하게 위생적인 물로 충분히 세척하여야 한다

4. 생식용 굴의 가공은 위생적인 장소에서 행하여져야한다. 또한 그 가공에 있어서는 화학적 합성품이 함유된 첨가물(차아염소산 나트륨은 제외)을 사용하여서는 안된다.

5. 탈각작업 후에 사용하는 물은 음용에 적합한 물, 살균한 해수 또는 음용에 적당한 물을 사용한 인공해수를 사용하여야 한다.

6. 탈각작업에 사용하는 기구는 세척 또는 살균이 용이한 것이여야 한다. 또한 그 사용에 있어서는 세척한 후 살균하여야 한다.

7. 탈각용기는 세척 및 살균이 용이한 금속, 합성수지등으로 만들어진 불삼투성의 것이여야 한다. 또한 그 사용에 있어서는 전용이여야 하고, 또한 세척하여 사용하여야 한다.

8. 탈각한 것은 음용에 적당한 물, 살균한 해수 또는 음용에 적당한 물을 사용한 인공해수로 충분히 세척하여야 한다.

9. 생식용 냉동굴에 있어서는 가공 후 신속하게 동결시켜야 한다.

10. 생식용굴의 가공중에 발생하는 굴 껍질에 대해서는 당해 가공을 실시한 장소의 위생 유지를 위해 신속하게 다른 장소로 반출하는 등의 처리를 하여야 한다.

11. 생식용 굴은 10℃ 이하에 보존하여야 한다. 단, 생식용 냉동굴에 있어서는 이것을 -15℃이하에서 보존하여야 한다.

12. 생식용굴은 청결하고 위생적인 뚜껑있는 용기에 담든지 또는 청결하고 위생적인 합성수지, 알루미늄 상자, 또는 물이 들어가지 않는 가공지로 포장하여 보관하여야 한다. 단, 생식용냉동굴은 청결하고 위생적인 합성수지, 알루미늄 상자, 또는 물이 들어가지 않는 가공지로 포장하여 보존하여야 한다.

[별표 2]

가공처리장의시설및장비기준(제4조관련)

가. 작업장은 위생상 유해한 장소에 시설되어서는 아니되며, 작업장의 지면은 만조시의 수면보다 60㎝이상 높아야 한다.

나. 원료(착각)굴 하치장소

1. 규모에 따라 적합한 넓이를 보유하여야 한다.

2. 바닥은 불침투성 재료로 구축되고, 그 표면이 평활하며 적당한 경사가 있어 배수를 완전히 할 수 있어야 한다.

3. 바닥은 오수 등이 유입되지 않도록 지면보다 적당한 높이가 있어야 한다.

4. 세척된 각부 굴의 운반에 사용되는 콘베이어나 용기는 청결하게 관리할 수 있는 자재로 제작되어야 한다.

다. 탈각 및 탈각굴 취급시설

1. 규모에 따라 적당한 넓이의 탈각작업실(탈각장)과 탈각굴 취급시설(처리장)이 설치 되어야 한다.

2. 탈각장 및 처리장은 벽으로 구분되어 있어야 하며, 처리장에는 탈각굴을 운반하는 창구(불침투성 재료)가 설치되어 있어야 한다.

3. 작업장 바닥은 불침투성 재료로 사용하되 그 표면이 평활하고 적당한 경사가 있어 배수가 잘되고 청소하기 쉬운 구조로 되어 있어야 한다.

4. 내벽은 바닥에서부터 1m이상 높이의 부분이 내구, 내수성 재료로 구축되어야 한다.

5. 천정은 청소가 용이한 구조로 되어 있고 곰팡이가 피었거나 먼지가 쌓여있지 않아야 하며 틈이 없도록 만들어져야 한다.

6. 작업장은 환기 및 채광시설이 충분히 되어 있어야 한다

7. 출입문은 밖으로 열려지고 비부식성 재질로서 청소가 용이하도록 만들어져야 한다.

8. 출입문과 창문에는 먼지, 쥐 등의 침입을 방지할 수 있는 설비가 되어 있어야 한다(원료 및 제품반입 출입문에는 비닐커텐 설치).

9. 작업장과 직결된 배수구에는 쥐 등의 침입과 하수의 역류를 방지할 수 있는 설비가 되어 있어야 한다.

10. 탈각작업대는 스텐레스 강판 등 불침투성 재료로 만들어져야 하며, 적당한 높이를 가지고 그 표면은 평활하여야 한다.

11. 탈각굴 취급대는 무독성 내수성 재료로 만들어지고 그 표면은 평활 하여야 한다

12. 작업장내 사용용수의 기준은 다음과 같다

1) 먹는물은 먹는물관리법 제5조 및 수도법 제18조의 규정에 의한 수질기준에 적합 하여야 하며, 상수도가 아닌 경우에는 먹는물수질기준및검사등에관한규칙(환경부령 제19호) 제2조의 규정에 의한 검사결과 적합 판정을 받은 것으로 하고 탈각굴 세척에 사용되는 해수는 청정해수(살균시킨 해수)로서 충분히 공급할 수 있어야 한다.

2) 배관은 녹이 슬어 있거나 오염되지 아니하도록 하여야 한다.

13. 탈각굴의 세척설비는 스텐레스 강판, 기타 용이하게 청정을 유지할 수 있는 재질로 만들어야 한다.

14. 청정해수를 공급하기 위하여 다음의 설비를 갖추어야 한다.

1) 필요에 따라 여과기 등을 갖춘 정수시설

2) 염소살균기 또는 자외선살균기 등 살균설비

3) 5℃이하의 냉각수를 공급할 수 있는 시설

15. 탈각에 사용하는 기구, 기기, 용기는 세척․살균이 용이한 재질로 만들어지고 그 표면이 평활하여야 한다.

라. 냉장시설

1. 탈각된 굴을 안전하게 보관할 수 있도록 5℃이하의 온도로 저장 할 수 있는 적당한 넓이를 가진 냉장실이 있어야 한다.

2. 냉장실의 바닥은 불침투성으로서 파인 곳이 없으며 배수 및 청소가 용이한 구조로 되어 있어야 한다.

3. 천정은 그 표면이 평활하고 청소가 용이한 구조이어야 한다.

4. 냉장실의 온도를 정확히 알 수 있는 전자관식 온도계를 온도가 가장 높은 장소에 비치하여야 한다.

마. 기타 시설

1. 세수설비는 종업원에게 온수를 충분히 공급할 수 있어야 한다.

2. 세수설비는 손을 사용하지 않고 이용할 수 있는 구조이어야 한다.

3. 폐기물 용기는 폐기물을 위생적으로 처리할 수 있도록 불침투성 재질로 만들어야 하며, 그 용기에는 뚜껑이 있어야 한다.

4. 화장실 및 탈의실은 환기장치와 방충시설이 되어 있는 수세식으로서 탈각장 및 처리장에서 격리되어 있어야 하며, 종업원 수에 비례하여 충분한 수량이 있어야 한다.

5. 갱의실은 탈각장 및 처리장과 칸막이 벽 등으로 격리되어야 한다.

6. 처리장에는 반드시 이용하고 출입될 수 있는 소독수조(깊이 20㎝)를 비치하여야 한다.

7. 작업장은 작업전후에 작업장의 바닥, 내벽, 탈각작업대, 기타 탈각 작업에 관련되는 모든 설비를 세척 및 소독하여야 한다.

[별표 3]

종업원 위생기준(제4조관련)

1. 신체의 노출부에 전염성 창상 또는 상처를 가진 사람, 탈각한 굴육에 전염될 우려가 있는 병균을 가진 자 또는 이에 감염된 자는 공장내의 출입을 금하여야 한다.

2. 관리자는 굴의 처리에 직접 종사하는 종업원의 보건을 철저히 관찰하고 가공작업 개시 전에 매년 1회이상 이질균 보균검사 항목을 포함한 건강진단을 실시하여야 한다.

3. 관리자는 종업원이 전염병에 걸렸다고 인정될 때에는 진단을 의뢰하고 완치될 때까지 가공공장내 출입을 금지하여야 한다.

4. 관리자는 설사나 후두염이 있는 종업원을 발견한 때에는 작업에 종사시켜서는 아니된다.

5. 탈각굴을 직접 취급하는 종업원은 매일 살균처리된 청결한 작업복, 작업모(위생모), 장갑(세척하기 쉬운 방수성일 것), 장화를 탈의실에서 작업개시 전에 갱의하여야 한다.

6. 탈각장의 종업원과 탈각굴 가공실의 종업원은 서로 다른 방에 출입하여서는 아니된다.

7. 종업원은 작업장에 들어갈 때에는 소독수와 청정수로써 반드시 손과 장화를 씻어야 한다.  손을 씻는 세수대의 수도꼭지는 수동식이 아니어야 하며, 손을 씻고 말릴 수 있는 시설이나 일회용 타올을 비치하여야 한다.

8. 종업원은 손에 매니큐어를 바르거나 귀금속 착용을 하여서는 아니된다.

9. 화장실 혹은 세수대 옆에는 위생을 고취시킬 수 있는 표어를 부착하여야 한다.

10. 작업장내에서 흡연, 음주, 식사, 침뱉는 행위를 해서는 아니된다.

11. 독성이 있는 쥐약 등은 가공공장에 두어서는 아니된다.

[별표 4]

등록공장자체검사항목(제5조관련)

가. 일반검사

1. 가공공장에 입하된 원료의 선도, 보관 관리상태

2. 위생적인 처리 가공상태

3. 공장 내외의 위생관리상태

4. 처리, 가공기구의 세척 및 소독상태

5. 작업장에서 사용하는 가공용수 검사

6. 종업원의 위생관리상태

나. 관능검사

1. 공장에 입하된 원료에 대하여 관능검사를 실시하여야 한다.

2. 관능검사에서 선도가 의심될 경우에는 화학적 검사 또는 미생물 검사를 실시하여야 한다.

[별표 5]

생식용생굴품질기준(제5조관련)

항 목	기 준
형 태	고유의 형태를 가지고 손상과 변형이 없을 것
색 택	고유의 색택이 있고 변색되지 아니한 것
냄 새	고유의 냄새를 가지고 이취가 없는 것
생 균 수	1그램중 50,000이하 일 것
분변계대장균	분변계대장균의 최확수가 100그램당 230을 초과하지 아니한 것

[별표 6]

해역의 위생관리 기준

1. 용어의 정의

가. “지정해역관리수역”이라 함은 지정해역 경계선으로부터 250m까지의 수역을 말한다.

나. “지정해역주변해역”이라 함은 지정해역 경계선으로부터 1천m까지의 수역(지정해역관리수역을 포함한다. 이하 같다)을 말한다.

2. 지정해역에서의 위생관리

가. 수질기준

(1) 바닷물의 분변계대장균 오염여부 실험은 최확수법으로 실시하되, 5개의 시험관으로 실시하는 때에는 바닷물 시료 100밀리리터당 최확수(MPN)의 중앙치 또는 기하 평균치가 14이하이고 계산된 백분위수의 90번째 값이 다음의 기준에 부합되어야 한다.

(가) 5개 시험관법을 사용한 시험에서 해수 100㎖당 MPN이 43이하

(나) 3개 시험관법을 사용한 시험에서 해수 100㎖당 MPN이 49이하

(2) 그 밖에 지정해역의 바닷물에 관하여 외국과의 협정 및 외국의 일정한 위생관리기준이 정하여져 있는 경우에는 그 기준에 적합하여야 한다.

나. 생산․채취하는 패류의 위생기준

(1) 패류독소의 기준

(가) 마비성 패류독소(PSP)     : 100 g당 80㎍

(나) 기억상실성 패류독소(ASP) : 20 ppm

(다) 설사성 패류독소(DSP)     : 0.05 MU/g

(2) 옥시테트라싸이클린 : 불검출

(3) 병원성 세균․식중독균 : 불검출

다. 관리선의 관리

(1) 수산업법 제27조제1항의 규정에 의하여 관할시장․군수 또는 자치구의 구청장으로부터 관리선으로 지정(변경 포함)을 받은 선박(이하 “관리선” 이라 한다)은 다음의 조건을 준수하여 지정해역에 출입하여야 한다

(가) 선박의 승무원은 국립수산과학원으로부터 해역위생관리기준에 관한 교육을 이수할 것

(나) 선박에는 지정해역을 출입할 수 있는 선박임을 증명할 수 있는 관리선 지정서를 비치할 것

3. 지정해역 및 지정해역 주변수역에서의 위생관리 조건

가. 어장이용개발계획 기본지침 등의 조건

(1) 해양수산부장관은 수산업법 제4조, 동법시행령 제2조 및 어업면허의 관리등에관한규칙 제2조의 규정에 의하여 수립하는 어장이용개발계획에 농수산물품질관리법 제71조의 규정에 의하여 지정된 지정해역의 보존 관리를 위하여 지정해역 및 지정해역 주변수역에서는 어류등 양식 어업중 가두리양식어업의 신규개발을 하지 아니 하도록 규정하여야 한다.

(2) 광역시장․도지사(시장․군수 또는 자치구의 구청장을 포함한다. 이하 같다)는 수산업법제4조의 규정에 의한 어장이용개발계획을 수립하는 때에는 해양수산부장관이 수립․통보한 어장이용개발계획기본 지침을 준수하여야 한다.

나. 지정해역 주변수역에 어류 등 양식어업의 면허를 받은 양식장에서는 지정해역의 수질 및 서식패류에 직․간접적인 영향을 주지 아니 하도록 다음사항을 준수하여야 한다.

(1) 사람의 분뇨를 바다에 직접 배출하지 아니하는 화장실(휴대용 간이화장실을 포함한다)을 갖추어야 한다.

(2) 세면․목욕․세탁 및 취사 등의 행위로 인하여 지정해역에 직․간접으로 오염시켜서는 아니된다.

(3) 개․고양이 등 동물을 사육하거나 방치하여서는 아니된다.

(4) 어류의 사료폐기물․음식쓰레기 그밖의 폐기물 등을 담아서 보관할 수 있는 뚜껑이 있는 용기를 구비하여야 하며 주기적으로 육상으로 옮겨 폐기 처분하여야 한다.

(5) 국립수산과학원장이 정하여 고시한 동물의약품안전사용기준고시에서 정한 동물용의약품의 용법․용량 및 휴약기간 등을 준수 하여야 한다.

다. 지정해역 및 지정해역 주변수역에 출입하는 선박은 다음의 위생조건을 준수하여야 한다.

(1) 해양오염방지법 제16조제1항의 규정에 의한 “선박으로부터 폐기물(분뇨 포함) 배출금지”를 준수하여야 한다.

(2) 개․고양이 등 동물을 사육하거나 방치하여서는 아니된다.

4. 해양수산부장관 및 광역시장․도지사는 지정해역 주변수역외의 인근 수역이 지정해역의 수질 및 서식패류에 직․간접으로 영향을 줄 우려가 있는 경우에는 어류 등 양식어업을 하는 양식장 및 선박(허가어업 포함)에 대하여 제3호를 준용할 수 있도록 필요한 조치를 할 수 있다.

[별표 7]

생식용생굴 세균수의 측정법 및 E.coli 최확수의 측정법

1. 검체의 채취 및 시료의 조제

○ 탈각하여 판매되는 굴에 대해서는 200g이상을 멸균기구를 사용하여 멸균용기에 채취하여 이것을 검체로 한다.

○ 탈각하지 않은 채로 판매되는 굴에 대해서는 패각을 알코올천으로 소독한 후 멸균 기구를 이용하여 패각을 제거한 후에 패즙을 포함하여 200g이상을 멸균용기에 채취하여 이것을 검체로 한다.

○ 다음으로 검체를 멸균호모게나이저컵으로 옮긴 후 인산완충희석수를 첨가하여 세절하여 이것을 시료원액으로 한다.

○ 다음으로 시료원액20ml에 인산완충희석수 80ml을 가하여 검체의 10배희석액을, 또한 이 10배희석액 10ml에 인산완충희석수90ml을 첨가하여 검체100배 희석액을 만들어 시료로 한다. 이외 필요에 따라서는 100배희석액의 제작방법에 준하여 검체의 단계희석액을 제작하여 시료로 한다.

○ 인산완충희석수 - 인산1칼륨(무수)34g을 500ml의 정제수에 녹여서 이것에 약 1mol/L 수산화나트륨용액 약175ml을 첨가하고  pH를 7.2로 조절하고 여기에 정제수를 추가하여 전량을 1,000ml로 맞춘 것을 원액으로 한다. 이 원액 1.25ml에 정제수를 추가하여 1,000ml로 하여 고압증기멸균을 한다.

2. 세균수(생균수)의 측정법

○ 조제한 시료중 1평판에 30에서 300개까지의 집락이 얻어지는 희석액을 선택하여 제1식품부 D 각조 각항 ○ 빙설 1 빙설의 성분규격 (2)의 2에 준하여 측정한다.

3. E.coli최확수의 산정법

○ 시료원액 2ml, 10배희석액 1ml 및 100배희석액 1ml을 각각 5개의 EC 발효관에 접종하고 항온수조를 사용하여 44.5℃(상하 0.2℃의 오차를 인정)에서 24시간( 전후 2시간의 여유를 인정)배양한다. 이때 가스발생이 인정된 시료원액이나 시료는 E.coli 양성으로 한다. 검체100g에 대한 E.coli최확수는 E.C.발효관에 접종된 이것의 시료원액이나 시료중 E.coli양성을 나타낸 것을 접종한 EC 발효관의 수에 대하여 다음의 표 (이하 ‘최확수표’라 한다)에 따라 산출된 계수를 10배로 한다.

○ E.C. 발효관 - 펩톤 20.0g, 유당5.0g, 담즙산염 1.5g, 인산2칼륨(무수) 4.0g, 인산 1칼륨(무수) 1.5g 및 식염 5.0g을 1,000ml의 정제수에 녹인다. 이것을 발효관에 분주하여 고압살균한 후 빠르게 냉각시킨다. 최후 pH는 6.8～7.0이어야 한다.

[별표 8]

이질균 시험법

Shigella sonnei의 試驗法(1)

		檢體25g(굴)을 스토마커 백에 평량
		Novobiocin을 첨가한 Shigella broth*1 225ml을 첨가한 후 때때로 손으로 비벼 교반한다.
		10分間 室溫放置(때때로 손으로 비벼 교반)
		10分間侯, 嫌氣條件下(가스發生 kit)에 둔다
		44℃ 20時間 嫌氣培養							PCR시험
		培養液을교반後,일(1)金耳를아래의 選擇分離平板培地 (MAC를 기본으로 각각의 배지에서 1종류씩 선택)에 접종
MAC1) (약한選擇力) 5個釣菌			CRT2)・DHL3)・XLD4) (中間的選擇力) 5個釣菌					에네츠5)・HEA6)・SS7) (강한選擇力 培地) 5個釣菌
			35～37℃ 18～24時間 培養
			普通寒天斜面에 劃線塗抹
			35～37℃ 18～24時間 培養
			確認試驗(生化學試驗/동정 kit)
			毒素遺傳子確認試驗(PCR)
			血淸型試驗

Shigella sonnei의 試驗法(2)

				檢體25g(굴)을 스토마커 백에 평량
				Buffered Peptone Water 225ml을 첨가한 후 때때로 손으로 비벼 교반시켜 가면서 10분간 실온 방치
				35～37℃ 18～24時間 培養
		培養液1ml을 Novobiocin을 첨가한 Shigella broth*1 10ml에 접종
				44℃ 20時間 嫌氣培養(가스發生 kit等)								PCR試驗
				培養液를교반後,일(1)白金耳를 下記의選擇分離平板培地 (MAC를 기본으로 각각의 배지에서 1종류씩을 선택)에 접종
MAC1) (약한選擇力) 5個釣菌					CRT2)・DHL3)・XLD4) (中間的選擇力) 5個釣菌						에네츠5)・HEA6)・SS7) (강한選擇力 培地) 5個釣菌
					35～37℃ 18～24時間 培養
					普通寒天斜面에 劃線塗抹
					35～37℃ 18～24時間 培養
					確認試驗(生化學試驗/동정 kit)
					毒素遺傳子確認試驗(PCR)
					血淸型試驗

이질균(Shigella sonnei)의 검사법 해설(참고)

1. 검체의 채취

1) 식품의 경우에는 200g이상을 채취한다. 또 표면오염이 우려되는 식품은 표면부 300～500㎠을 두께 0.2～0.3mm을 잘라 채취한다.

2) 물의 경우에는 채수병의 입구를 알콜솜 등으로 살균후 3L이상을 채수한다. 수조에서 직접 채수하는 경우에는 국자 등을 사용하고 염소 소독한 물은 치오염산나트륨으로 중화한다.

2. 시료의 조제

1) 식품

채취한 검체의 전체를 세절한 후 이것을 혼합하여 25g을 채취한 후  스토마커 bag (피펫이 막히는 검체에는 필터기능이 있는 것을 사용)에 평량하여 시료로 사용

2) 물

채취한 검체의 3L를 Membrane filter(Pore size 0.45㎛)로 여과한다. 필터가 도중에서 막히는 경우에는 새로운 filter를 추가사용한다. 검수 성분이 다르고 부유물 등으로 1매의 필터로 여과가 어려울 경우에는 물 시료(3L)을 적당히 나누어 여과한다.

3) 양성대조의 제작방법과 사용방법

이질균(shigella sonnei) 균주(보통한천사면보존주)의 일(1)백금이를 TSB(3ml)에 접종, 35～37℃에서 18시간 배양한다. 이 배양액 1ml을 0.1%Peptone첨가 멸균생리식염수(9ml)에 단계 희석하여 10-5배 희석용액을 만든다. 이 10-5희석액 1ml을 40ml의 0.1%peptone첨가 멸균생리식염수에 희석한 균액을 시료로 한다. 본 시료 200㎕을 검체 25g에 접종하여 양성대조균으로 한다. 양성대조에 사용되는 균주는 PFGE(DNA pattern)이 확인된 것을 사용한다.

3. 증균배양

1) 식품

스토마커 bag중의 시료에 증균배지  225ml을 첨가한 후 때때로 손으로 비벼가면서 10분간 실온에 방치한다. (스토마커처리는 하지 않는다.) 실온방치 후 증균배지가 BPW의 경우는 35～37℃에서 44℃에서 18-24시간 호기 배양한다. 증균배지가 Shigella broth인 경우 18-24시간 혐기배양을 한다. 단 식중독 검체의 검사에 있어서는 검사 검체수를 늘린다든지, 1차 및 2차 증균을 추가하고 Shigella broth를 이용한 3차증균이나 자기비즈법등을 첨가하여 분리 평판배지의 종류를 늘리는 것 등이 필요할 것으로 생각된다.

2) 물

여과한 필터를 필요에 따라서 세절하고, 중 시험관등의 적당한 멸균 용기에 넣어 증균배지가 BPW인 경우에는 배지 15ml을 첨가하고 35-37℃에서 18-24시간 호기배양한다. 증균배지가 Shigella broth의 경우 배지 15ml을 첨가하여 44℃에서 18-24시간 혐기 배양한다.

4. 증균용 배지

1) BPW(Buffered Peptone Water) (OXOID, MERCK, 榮硏. 기타)

Peptone	10.0g
NaCl	5.0g
Na2HPO4	4.0g
KH2PO4	1.5g
증류수	1000ml
pH	7.2±0.1

★ : 121℃, 15min 멸균 후 40℃정도로 냉각하여 사용한다. *인산완충제의 경우는, 배지 Maker에 따라 다르지만, 어느 Maker의 것을 선택해도 큰 차이는 없다.

2) Shigella broth (자가조제 OXOID)

Tryptone	2.0g
K2HPO4	2.0g
K2H2PO4	2.0g
NaCl	5.0g
Glucose	1.0g
Tween 80	1.5ml
Novobiocin	0.5ml
증류수	1000ml
pH	7.0±0.2

★ : Novobiocin 이외의 모든 조성(31.5g/L)을 플라스크에 넣어 1L의 정제수를 넣어 용해하고 121℃, 15분간 autoclave한다. Novobiocin 50mg을 1L의 정제수에 용해하고, 0.2㎛ Membrane filter에 여과멸균한다. 조제한 Novobiocin용액을 멸균한 배지 225ml에 2.5ml의 비율로 첨가한다.(ISO에서는 Novobiocin 25.0mg을 1L의 정제수에서 용해하고 5ml를 첨가하는 것으로 되어 있다. Tween 80의 비중이 1.08이기 때문에 1.5g/L로 첨가하여도 된다.

혐기배양

・혐기쟈(OXOID, MERCK, BBL, 미쯔비씨 화학, 기타)

・혐기성균용 가스 발생 키트 (OXOID, BBL, 미쯔미씨 화학, 기타)

★ 혐기쟈를 사용한 혐기배양의 수순

①혐기성균용가스발생 키트를 혐기쟈에 setting한다. 촉매가 필요한 경우에는 이것도 동시에 setting한다.

②배양하는 검체를 혐기자에 넣는다.

③혐기성지시약을 혐기자에 setting한다.

④혐기성균용가스발생키트를 활성화하여 혐기자에 setting한다

⑤쟈를 밀봉하고 인디케이터의 색으로 혐기가 된 것을 확인한 후 44℃에서 20시간 배양한다.

5. 분리배양

식중독 검사 등에 있어서는 표적균(赤痢菌: Shigella sonnei)을 분리하는 데는 많은 단리 집락이 출현할 필요가 있으므로 사용하는 분리배지의 종류나 평판수를 늘린다든지 또는 증균배양액을 희석하는 등의 조작을 하여야 한다. 조균(釣菌)하는 집락은 의심이 가는 집락을 가능한 한 많이 조균하지 않으면 의심되는 균을 얻는 것이 어려우므로 분리용배지로서는 아래의 것을 이용하여야 하나 배지조성은 메이커에 따라서 약간 다를 수 있으므로 각각의 연구실 또는 검사실에서 일상적으로 사용하는 데 익숙한 배지를 사용하도록 노력한다. 처음으로 사용하는 곳에서는 표준균을 이용하여 분리배지에 접종한 후 집락의 크기나 색조, 형상등을 확인해 두어야 한다.

1) MAC : MacConkey agar No.3 (OXOID, Difco, 榮硏, 日水, 기타) 조성

Peptone	20.0g
Lactose	10.0g
Bile Salt No.3	1.5g
NaCl	5.0g
Neutral Red	0.03g
Crystal Violet	0.01g
Agar	15.0g
정제수	1000ml
pH	7.1±0.2

★ : 모든 조성(51.5g/L)을 플라스크에 넣고 1L 정제수를 가하여 가온용해한다.

용해후 121℃․15분간 autoclave한 후 50℃정도까지 냉각하고 20ml씩 멸균샤알레에 분주한다.

2) CRT : CHROMagarO157 TAM (CHROMagar : 관동화학) 조성

Peptone과 NaCl	31.5g
Agar	12.0g
특수염색소혼합물	1.0g
정제수	1000ml
pH	7.2

★ : 모든 조성(44.5g/L)을 플라스크에 넣고 1L 정제수를 가하여 가온용해한다.

용해후 50℃정도까지 냉각하고 20ml씩 멸균샤알레에 분주한다. autoclave를 사용하여 멸균하여서는 안된다.

3) DHL agar(日水, 榮硏, OXOID, MERCK, 기타) 조성

Meat Extract	3.0g
Peptone	20.0g
Lactose	15.0g
Saccharose	10.0g
Sodium Deoxycholate	1.0g
Sodium Thiosulfate	2.3g
Sodium Citrate	1.0g
Ferric Ammonium Citrate	1.0g
Neutral Red	0.03g
Agar	15.0g
증류수	1000ml
pH 7.0±0.2

★ : 모든 조성(63.3g/L)을 플라스크에 넣어 1L 정제수를 가하여 가온용해한다.

용해후 50℃정도까지 냉각하고 20ml씩 멸균샤알레에 분주한다. autoclave를 사용하여 멸균하여서는 안된다.

4) XLD agar (OXOID, 榮硏, Difco. MERCK, 기타)

Yeast Extrate	3.0g
Lactose	7.5g
Saccharose	7.5g
Xylose	3.75g
L-Lysine(HCl)	5.0g
Sodium Deoxycholate	1.0g
NaCl	5.0g
Sodium Thiosulfate	6.8g
Ferric Ammonium Citrate	0.8g
Phenol Red	0.08g
Agar	12.5g
정제수	1000ml
pH	7.4±0.2

★ : 모든 조성(52.9g/L)을 플라스크에 넣어 1L 정제수를 가하여 가온용해한다.

용해후 50℃정도까지 냉각하고 20ml씩 멸균샤알레에 분주한다. autoclave를 사용하여 멸균하여서는 안된다.

5) 에네츠 : Salmonella Agar acc. to Onoz(MERCK) 조성

Yeast Extract	3.0g
Meat Extract	6.0g
Meat Peptone	6.8g
Lactose	11.5g
Sacchorose	13.0g
Bile Salt Mixture	3.825g
Sodium Citrate	9.3g
Sodium Thiosulfate	4.25g
L-Phenyalanine	5.0g
Ferric Citrate	0.5g
Magnesium Sulfate	0.4g
Brilliant Green	0.00166g
Neutral Red	0.022g
Aniline Blue	0.25g
Metachrome Yellow	0.47g
K2HPO4	1.0g
Agar	15.0g
정제수	1000ml
pH	7.1±0.2

★ : 모든 조성(80.5g/L)을 플라스크에 넣어 1L 정제수를 첨가하여 가온 용해한다.

용해후 50℃정도까지 냉각하고 20m씩 멸균샤알레에 분주한다.

autoclave를 사용 하여 멸균하여서는 안된다. 본배지는 녹이기 어려우므로 주의할 것

6) HEA : Hektoen Enteric Agar (OXOID, Difco, 기타) 조성

Proteose Peptone	12.0g
Yeast Extract	3.0g
Lactose	12.0g
Saccharose	12.0g
Salicin	2.0g
Bile Salt No.3	9.0g
Nacl	5.0g
Sodium Thiosulfate	5.0g
Ferric Ammonium	1.5g
Acid Fuchsin	0.1g
Bromthymol Blue	0.065g
Agar	14.0g
정제수	1000ml
pH	7.5±0.2

★ : 모든 조성(76.0g/L)을 플라스크에 넣고, 1L 정제수를 가하여 가온용해한다.

용해후 50℃정도까지 냉각하고 20ml씩 멸균사알레에 분주한다. autoclave를 사용하여 멸균하여서는 안된다. 본배지는 녹이기 어려우므로 주의할 것

7) SS Agar : Salmonella Shigella Agar (OXOID, 日水, 榮硏, MERCK, Difco)

Meat Extract	5.0g
Peptone	5.0g
Latose	10.0g
Bile Salt	8.5g
Sodium Citrate	8.5g
Sodium Thiosulfate	8.5g
Ferric Citrate	1.0g
Brilliant Green	0.00033g
Neutral Red	0.025g
Agar	13.5g
정제수	1000ml
pH	7.0±0.2

★ : 모든 조성(60g/L)을 플라스크에 넣고, 1L 정제수를 가하여 가온용해한다.

용해후 50℃정도까지 냉각하고 20ml씩 멸균샤알레에 분주한다.

autoclave를 사용하여 멸균하여서는 안된다.

6. 확인배양

분리 평판 배지상에 발육한 赤痢菌(Shigella sonnei)으로 의심되는 집락을 선택하여 보통 한천사면배지에 접종하고 35-37℃에서 18-24시간 배양한다. 이 배지를 기본 균주로 해서 그람염색, 옥시다제 및 카탈라제 실험을 실시한다. 또 보통부이온에 접종, 배양후 본배양액을 TSI 사면한천배지, LIM배지, 포도당첨가보통부이온(타람관넣은 것), 오르니틴배지, 시몬스구연산염사면한천배지 및 acetate 사면배지의 각각에 접종 하여 35-37℃에서 18-24시간 배양한다. 배양 후 TSI사면한천배지에서 고층부 황변, 사면부 적변(황변의 경우도 있음), H2S 음성, 당에서의 가스발생 음성(TSI에서 당으로부터 가스발생유무를 판별할 수 있으나 당의 종류를 특정하기가 곤란), 포도당에서의 가스발생 음성, LIM배지에서 운동성 없음, Indole 음성, H2S 음성, 리신디카르복실라제 음성, 오르니틴디카르복실라아제 양성, 구연산염배지 음성 및 acetate 배지 음성의 균주를 이질균 음성으로 확정하고 혈청학적 시험을 실시한다.

※ 赤痢菌(Shigella sonnei)의 중요한 생화학성상

Gram stain (-)

Cytochrome oxidase (-)

Catalase (+)

Motility(-)

Indole(-)

Lycine decarboxylase(-)

포도당에서의 가스발생 (-)

Lactose 분해성(-)양성의 경우 있음 (-)

Saccharose 분해성(-)양성의 경우 있음(-)

H2S발생 (-)

Ornitine decarboxylase (+)

Citrate (-)

Acetate 배지 (-)

Indole시험 (Kovac's 방법)

배양을 종료한 LIM배지에 운동성 및 라이신디카르복실라아제의 양성 음성을 관찰, 기록한 후 LIM배지에 클로로포름 약 1ml을 중층한다.(침투하여서는 안 된다) 다음 으로 Kovac's 시약 약 1ml을 적하한다. 양성의 경우 클로로포름의 층이 적색이 된다. 대장균은 양성이지만 이질균은 음성으로 변화하지 않는다. Kovac's 시약은 p-dimethylbenzaldehyde 5g을 아밀알콜 또는 이소아밀알콜 75ml에 녹이고 그 위에 농염산 25ml을 가하여 만든다. 냉장고에서 보존하면 장기간 사용할 수 있다.

Cytochorme oxydase의 확인법

한천평판배지상에서 이질균이라고 생각되어지는 집락을 선택하고, 그 균체를 정제수에 소량 혼탁시켜 시험용 여과지 위에 살짝 부착시킨다 cytochrome 양성균은 1분이내에 피검균의 부착부분에 짙은 푸른색을 나타낸다. 음성균은 변화하지 않는다. 색깔의 변화가 명확하지 않은 경우에는 유리봉을 이용하여 다시한번 실시한다.

・옥시타제 감별용 스틱(OXOID : 關東化學 No.714064・1) 100本 定價6,800엔

・옥시타제 테스트(BBL : No.261181) 50個 定價 7,500엔

Catalase 시험법

한천평판배지상의 이질균이라고 생각되는 집락을 선택하여 그 균체를 슬라이드글라스나 유리글라스에 부착시킨다. 부착시킨 부분에 3%과산화수소수를 캐필러리튜브 또는 주사기로 적하한다.  카탈라제양성균은 기포가 발생한다.

A) LIM배지 (日水, 榮硏, MERCK, 기타) 조성

Peptone	12.8g
Yeast Extract	3.0g
Glucose	1.0g
L-Lysine(HCl)	10.0g
L-Typtophan	0.5g
Bromcresol Purple	0.02g
Agar	2.7g
pH	6.8±0.1

★ : 모든 조성(30g/L)을 플라스크에 넣고, 1L 정제수를 가하여 가온용해한다.

작은 시험관에 분주하고, 121℃․15분간 autoclave한 후, 급냉하여 고층배지가 되도록 한다.

B) TSI 배지 (OXOID, 日水, 榮硏, MERCK, 기타) 조성

Meat Extract	5.0g
NaCl	5.0g
Peptone	15.0g
Lactose	10.0g
Saccharose	10.0g
Glucose	1.0g
Ferric(Ⅱ) Citrate	0.2g
Sodium Thiosulfate	0.2g
Phenol red	0.02g
Agar	15.0g
pH	7.4±0.1

★ : 모든 조성(61.4g/L)을 플라스크에 넣고, 1L 정제수를 가하여 가온용해한다.

작은 시험관에 분주하고, 121℃․15분간 autoclave한 후, 사면배지가 되도록 한다.

C) Ornithine 배지(메라)  (榮硏, 기타) 조성

Peptone	5.0g
Meat Extract	5.0g
Pyridoxal Phosphate	5.0mg
Glucose	0.5g
L-Lysine(HCl)	10.0g
Bromcresol Purple	0.02g
Cresol Red	0.01g
pH	6.0±0.1

★ : 모든 조성(60g/L)을 플라스크에 넣고, 1L 정제수를 가하여 가온용해한다.

작은 시험관에 분주하고, 121℃․15분간 autoclave 한다.

D) Simmons Citrate 배지 (榮硏, OXOID, MERCK, 日水, 기타)

Dipotassium Phosphate	1.0g
Ammonium Dihydragen Sulfate	1.0g
Sodium Citrate	2.0g
Magnesium Sulfate	0.2g
NaCl	5.0g
Bromthymol Blue	0.024g
Agar	15.0g
pH	6.7±0.1

★ : 모든 조성(24.2g/L)을 플라스크에 넣고, 1L 정제수를 가하여 가온용해한다.

작은 시험관에 분주하고, 121℃․15분간 autoclave한 후, 사면배지가 되도록 한다.

E) Acetate agar (자가조정)  조성

Sodium Acetate	2.0g
NaCl	5.0g
Magnesium Sulfate(7수염)	0.2g
Ammonium Phosphate	1.0g
KH2PO4	1.0g
Bromthymol Blue	0.08g
Agar	20.0g
증류수	1000ml
pH	6.7±0.1

★ : 황산마그네슘을 제거한 전체 조성을 플라스크에 넣고, 1L정제수를 가하여 가온용해한다. 용해후 황산마그네슘을 가하여 pH6.7로 조정한다. 만들어진 Acetate agar를 8ml씩 중 시험관에 분주․솜마개(실리콘 마개, 몰튼 마개, 기타)하여 121℃․15분간 autoclave한 후, 사면부가 5cm가 되도록 사면한천으로 만든다.

Acetate agar 양성균(E. coli) 및 음성균(S. sonnei)를 본배지사면에 접종하고, 35～37℃․24～72시간배양한다. 배양후 양성균은 사면부 또는 배지면 전체가 짙은 청색(남색)으로 된다. 음성균에서는 변화없다.

★ : 35～37℃․24～72배양후, 변화를 보이지 않는 경우에도, 즉 음성이라도 7일간 배양할 것을 추천한다.

7. 혈청학적 실험

이질균은 1949년의 Ewing의 제안을 기초로 하는 국제장내세균형별 소위원회 권고(1984년)에 따라 생화학적 성상과 균체항원(○항원)를 사용한 혈청학적 성상에 의해 분리한 Dysenteriae 이질균 (Shigella dysenteriae, A아군), Flexineri 이질균(Shigella flexineri, B아군), Boydii 이질균(Shigella boydii, C아군) 및 Sonnei 이질균(Shigella sonnei, D아군)의 4종류로 나누어져 있다. 또 항원형에 따라 S.dysenteriae는 다시 12혈청, S.flexneri는 형항원과 군항원 6혈청형․13아형, S.boydii는 18혈청형으로 나누어져 있고 S.sonnei의 경우 혈청형은 1종으로 S-R변이에 따라 Ⅰ相(Smooth)형과 Ⅱ相(Rough)형이 있다.

※ 실험방법

생화학적인 실험에 의해 赤痢菌으로 동정된 균주를 보통부이욘배지에 접종하여 35～ 37℃, 18～24h 배양한 후 보통한천평판배지에 획선접종, 호기배양하여 순수분리되었는지 확인한 후 여기서 5～6개의 집락을 따내어 0.5ml 생리식염수에 부유시켜 항원액으로 사용한다.

①슬라이드응집법

유리연필로 슬라이드글라스 또는 투명글라스를 구분하여 매 구획마다 각 다가혈청 및 생리식염수(30㎕)를 적하한다. 여기에 항원액을 1백금이(또는 마이크로피펫으로 5-10㎕)를 두어 잘 혼합한다. 슬라이드 글라스 또는 투명 글라스 전후, 사면으로 움직여 가며 응집반응을 확인한다.

②인자혈청

다가혈청에서 양성으로 판정되는 경우에는 그 다가혈청을 구성하는 인자혈청을 사용하여 같은 방법으로 실험을 실시한다.

③결과의 판정

응집의 관찰은 빛을 투과시켜 관찰한다. 우선 응집항원이 생리식염수와의 반응으로 응집하지 않는 것을 확인하고 각 혈청과의 반응에서 1분간이내에 강한 응집이 나타나는 것을 양성으로 한다.

★ 赤痢菌중에 생균으로 형별불능한 주가 있다. 이질균으로 동정된 균이 다가혈청에서 음성인 경우는 위의 실험과 같이 5～6개의 집락을 선택한 후 3ml의 생리식염수에 부유시킨 후 121℃․15min 또는 100℃․60min간 가열처리 후 3000rpm으로 10min간 원심분리 후 상등액을 버리고 침전물에 0.5ml의 생리식염수를 첨가하여 균일하게 부유시켜 항원액으로 사용한다. 복수의 다가혈청에 양성을 나타낸다든지, 복수의 혈청형에 양성을 나타내는 경우에는 순수배양되었는지를 확인한 후 생화학성상을 재확인 하여 가열항원을 조절하여 재실험 할 것. 또 다가혈청만으로는 이질균을 추정하지 말 것.

8. 이질균 및 장관 침입성 대장균인자 유전자의 PCR에 의한 검출

ipaH 유전자는 genome 또는 플라스미드의 어딘가에 존재하는 것으로 알려져 있고 대부분의 이질균주는 이 유전자가 양성이나 아직 그 기능은 알려져 있지 않다.

InvE 유전자는 플라스미드 상에 있는 침투성 유전자이므로 탈락하는 경우가 있다.

ipaH 유전자 양성주 중, 약 50%가 invE 유전자 양성주로 알려져 있다.

또한 이러한 유전자를 검출한다 하더라도 이질균과 대장균의 구별이 어려우므로 다른 생화학적인 성상으로 판정할 필요가 있다.

PCR를 위한 검체 DNA액 조정

①Broth 검체의 PCR

배양액 1ml을 1.5ml tube에  채취하여 5,000rpm, 2분간 원심분리후 상등액을 버리고(감염성이 있는 경우도 있으므로 분리한 액은 멸균하고 pipet 등으로 가능한 한 배양액만을 건져낼 것), 멸균증류수 100㎕를 첨가하여 교반후 95℃ 5분간 가열후 13,000rpm으로 10분간 원심분리하고 상등액을 분리사용한다.

②Colony 검체의 PCR

1.5ml tube에 100㎕의 멸균수를 넣고 콜로니를 백금선으로 채취 혼탁시켜 ①의 가열로부터 같은 방법으로 처리한다.

PCR하는 방법

TaKaRa의 Ex Taq과 TaKaRa 특수세균검출용 Primer set (이질균 및 장관침입성 대장균 invE 및 ipaH 유전자검출용)을 사용.

①PCR 시약

TaKaRa Ex Taq (RR001)

②Primer set

TaKaRa invE 유전자검출용 Primer set INV-1/2(S016)

TaKaRa ipaH 유전자검출용 Primer set IPA-1/2(S017)

③반응액 조성

×10 Ex Taq 첨부 buffer          : 2㎕

첨부 dNTP Mixture(2.5mM each)  : 2㎕

Primer INV-1                    : 0.2㎕

Primer INV-2                    : 0.2㎕

Primer IPA-1                    : 0.2㎕

Primer IPA-2                    : 0.2㎕

Ex Taq                          : 0.1㎕

멸균증류수                       : 14.5㎕

Template DNA(검체 DNA액*)     : 1㎕

* 상기, 검체 DNA액 조정 ①, ②로 조정한 검체 DNA액을 사용

④PCR조건

열변성             : 94℃ 30sec

Annealing         : 55℃ 30sec

Elongation         : 72℃ 30sec

35cycle 후 72℃ 7min간 Elongation 후에 4℃로 온도를 낮추어 종료.

⑤결과판정

2% agarose(EtBr 0.5㎍/ml)에 의한 전기영동결과 목적의 유전자 INV-1/2 Primer set에 의해 293bp, IPA-1/2 primer set에 의해 242bp의 DNA band가 출현한 것을 양성으로 판정한다. ipaH는 이질균 및 장관침입성대장균의 존재를, 병원인자에서는 invE의 존재가 필요하므로 판정재료로서 생각할 수 있다.

[별지 제1호서식]

생식용생굴가공시설등록신청서						처 리 기 간
						15일
신청인	① 성 명		② 주민등록번호
	③ 주 소	(전화번호 : )
④ 공장의 명칭
⑤ 공장의 위치
⑥ 공장의 부지면적(㎡)			⑦ 건물의 종류 및 연면적의 합계(㎡)
⑧ 1일 생산능력(M/T)			⑨ 용수의 종류
⑩ 제조업 허가번호
생식용생굴대일수출요령에 의거 가공시설 등록을 신청합니다. 년 월 일 신청인 (서명 또는 인) 국립수산물품질관리원장 귀하
구비서류 : 1. 제조허가증 사본 1부. 2. 공장시설 배치도 1부. 3. 제조공정도 1부. 4. 기기 배치도 1부. 5. 용수배관 배치도 및 용수 흐름도 1부.							수수료
							없 음

210mm×297mm (일반용지 60g/㎡(재활용품)

이 신청서는 아래와 같이 처리됩니다.

＜뒷쪽＞

신 청 인						경 유 기 관						처 리 기 관
						국립수산물품질관리원 지원						국립수산물품질관리원
	신청서 작성												접 수
								검토					검 토
			교부
													현 장 검 사
													등록증 작성

[별지 제2호서식]

시설 및 위생관리 점검표
기 업 명
점 검 일 시	년 월 일
점 검 자
입 회 자
종 합 결 과	등급
세부점검결과

1. 구조설비기준

항 목	사 항	세 부 사 항	평 가	비 고
구조설비의 일반기준	외 곽	①입지조건이 적합함 ②폐수의 배수가 잘 되어 고여 있지 않음 ③주위가 청결하여 제품을 오염케 할 우려가 없음 ④작업장의 지면이 만조시의 수면보다 60㎝이상임
	건 물	①작업에 지장이 없는 충분한 넓이를 갖추고 있음 ②박신장과 박신굴 취급장이 적당하게 설치되어 있으며 벽으로 구분되어 있음 ③외부로 통하는 창구가 청결하고 위생적임 ④내부시설이 위생적으로 유지시킬 수 있도록 설계 배치됨 ⑤처리장에서 박신굴을 운반하는 창구가 설치되어 있음

210mm×297mm (일반용지 60g/㎡(재활용품)

항 목	사 항	세 부 사 항	평 가	비 고
구조설비의 개별기준	바 닥	①내수성 재료로 되어있음 ②청소가 용이한 구조로 되어 있고 청소상태가 양호함 ③바닥이 파여 있거나 바닥에 물이 고여 있지 않음 ④배수설비가 설치되어 있으며 배수구에는 쥐 등 침입을 방지할수 있는 설비가 되어 있음 ⑤배수로 뚜껑이 녹슬거나 부식되어 있지 않음 ⑥배수가 용이하도록 경사가 있으며 폐수의 역류현상이 없음 ⑦배수로의 청결상태가 양호하며 퇴적물이 쌓여있거나 썩지 않음
	벽	①곰팡이가 발생하지 않으며 청소가 용이한 구조로 되어 있음 ②내수성 구조로 되어 있음 (바닥으로부터 1m이상) ③갈라진 틈이 없으며 파손된 부분이 없고 평활한 구조임
	천 정	①청소가 용이한 구조임 ②곰팡이가 피어있거나 먼지가 쌓여있지 않음 ③빗물이 새거나 응결수가 떨어지지 않음
	문	①출입문은 밖으로 열려지고 자동적으로 폐쇄할 수 있는 비부식성 재질로 되어있음 ②청소가 용이한 구조임 ③틈이 없고 오염물질, 해충, 설치류 등의 침입을 방지할 수 있는 설비가 되어있음

항 목	사 항	세 부 사 항	평 가	비 고
	환 기 조 명 손 세 척 및 소독설비 기기 및 설 비	④출입구 문턱이 오수 등이 유입되지 않도록 밑바닥으로부터 적당한 높이가 있음 ①충분한 환기시설이 되어 있음 ②환기가 원활히 이루어져 혼탁한 공기나 증기가 있지 않으며 불쾌한 냄새가 없음 ①작업장 등의 조명등에 방호장치가 설치됨 ②조명상태가 작업에 지장 없음 ①온수설비가 만들어짐 ②손을 사용하지 않고 이용할 수 있는 구조로 되어 있음 ③페달식 뚜껑이 있는 휴지통이 비치되어 있음 ④소독수가 비치되어 있음 ⑤종업원수에 비례하여 충분한 수량을 갖춤 ①박신작업대가 내수성 재료로서 적당한 높이를 가지고 표면은 평활함 ②박신굴을 운반하고 저장하는 용기가 적당한 높이에 있음 ③박신굴의 세척설비는 스테인레스 등 청결을 유지할 수 있는 재질로 되어 있음 ④세척용유수장치가 2개이상있거나 자동유수장치가 구비되어 있음 ⑤청정해수공급을 위한 해수처리설비가 있음

항 목	사 항	세 부 사 항	평 가	비 고
	기기‧기구 세척 및 소독설비 냉장설비 처리대,컨베이어 벨트 등 급수설비	①기기, 설비, 기구 등을 세척 및 소독할 수 있는 장비를 갖추고 작업장의 모든 설비를 세척 소독하고 있음 ②세척, 소독을 한 기구의 위생관리가 철저함 ③세척이나 소독 등에 사용되는 약품의 보관상태가 적정함 ④기기, 기구의 구조가 세척이나 소독에 용이함 ①5℃이하로 저장할 수 있는 냉장설비가 있음 ②천정은 평활하고 청소가 용이한 구조로 되어 있음 ③바닥은 불침투성으로서 파인 곳이 없으며 배수 및 청소가 용이한 구조로 되어 있음 ④냉장실의 온도를 알수 있는 전자관식 온도계가 있음 ①세척, 소독이 가능한 비부식성인 재질로 되어 있음 ②기구 등의 청결상태가 양호 ①급수량이 충분하며 필요한 곳에 급수설비가 되어 있음 ②식용수와 비식용수의 배관에 구별을 위한 표식이 있음 ③정기적인 수질검사를 하며 검사결과의 기록이 보존됨 ④저수조가 위생적이며 정기적인 청소를 실시 ⑤배관이 녹슬어 있거나 오염되어 있지 않음

항 목	사 항	세 부 사 항	평 가	비 고
	화 장 실, 탈 의 실, 세수설비 폐 기 물 등 관리	⑥청정해수를 공급하기 위해 정수 및 살균, 냉각설비가 되어 있음 ①인원수에 비례한 적정한 수량의 시설이 있음 ②위생관념을 고취하기위한 표어가 있음 ③화장실의 위치가 적당하며 적정한 넓이 및 편리한 구조임 ④화장실이 작업장 및 처리장과 마주하지 않음 ⑤갱의실은 박신장과 격리되어 있음 ⑥화장실의 시설구조가 수세식임 ⑦화장실, 탈의실에 외부로 통하는 환기시설이 있음 ⑨방충, 방서시설이 구비됨 ⑩화장실에 손, 발을 세척, 소독할 수 있는 시설 및 말릴수 있는 시설이 설비되어 있음 ⑪화장실 및 탈의실에 뚜껑이 있는 휴지통이 구비됨 ①용기는 폐기물을 위생적으로 처리할 수 있도록 불침투성 재질로 되어 있고 뚜껑이 있음 ②굴 껍질 및 오물 등은 작업장에서 신속히 반출되고 있음 ③세정시 발생되는 오수․오물등은 환경위생상 문제가 발생하지 않게 적절히 처리됨 ④패각저장장소는 작업장과 떨어져 있음

항 목	사 항	세 부 사 항	평 가	비 고
	저 장 위험물질 관 리	①저장방법이 식품의 변패나 오염을 일으킬 우려가 없음 ②저장실이 청결하며 정기적인 청소를 실시함 ③품목별 입․출고 현황판이 비치되어 있음 ④저장실은 틈이 없어 쥐의 출입 및 먼지 등의 오염 우려 없음 ①살충제 등과 같은 유독성 물질에 대한 경고문의 표기가 있음 ②위험물의 보관전용함이 있으며 잠글수 있는 장치가 있음 ③인화성물질의 “취급주의”표시가 있으며 안전관리 및 보관상태가 양호함

2. 위생관리기준

항 목	사 항	세 부 사 항	평 가	비 고
일반기준	쥐, 곤충류의 대 책 제 품 취 급 구역,설비된 기기,기구등 처리공정	①시설내의 설치류, 곤충류의 구제, 침입방지 등의 대책을 계획적으로 수립 시행함 ②해충이나 조류, 쥐 등이 공장안에 보이지 않음 ①제품의 처리 가공기구가 전용으로 사용됨 ②처리방법이 제품을 오염시킬 우려가 없음 ③식품과 접촉하는 기구의 표면이 유해성 물질에 오염되어 있지 않음 ④기구의 정리정돈이 잘되어 있음 ⑤식품에 접촉하는 기기의 표면이 세척이나 검사를 실시하기에 용이함 ⑥가공기기 및 기구의 청결상태가 양호함 ①작업공정별 위생관리가 적정하며 처리가 신속함 ②사용용기를 위생적으로 취급 및 보관하여 제품의 오염가능성이 없음 ③처리과정중의 제품 오염방지를 위한 위생적인 조치가 있음 ④오염방지를 위하여 서로 다른 가공단계에 종사하는 종업원의 출입통제가 이루어짐

항 목	사 항	세 부 사 항	평 가	비 고
종사자의 위생기준	종사자의 위생관리	①작업장에서 사용되는 고무장갑이 깨끗함 ②신체에 창상, 벗겨진데 혹은 외상을 가진채 종사하고 있지않음 ③작업장에서 껌을 씹거나 음식물을 먹거나 담배를 피우거나,침을 뱉는 행위를 하지 않음 ④작업장에서 위생복, 위생모, 위생마스크를 올바르게 착용함 ⑤작업장에서 종사하는 종업원은 매니큐어를 바르거나 귀금속을 착용하고 있지 않음 ⑥종업원의 작업개시전후 혹은 용변후 오염구역에서 비오염구역으로 이동하는 경우 세정제와 소독수로 손을 깨끗이 씻음 ⑦종업원의 정기적인 신체검사에 관한 기록이 있으며 위생교육을 실시함

3. 가공처리 기준

항 목	사 항	세 부 사 항	평 가	비 고
가공기준	원 료 가 공 보 관	①굴을 지정된 해역에서 채취하고 있음 ②입하후 신속히 위생적인 용수로 충분히 세정하고 있음 ①가공처리를 위생적인 장소에서 행하고 있음 ②가공시 화학적 합성품인 첨가물을 사용하지 않음(차아염소산나트륨은 제외) ③박신굴을 신속히 위생적인 용수로 충분히 세정하고있음 ④세정후 굴의 10배이상 냉각용수를 사용하여 탈각후 2시간이내에 5℃이하에 냉각하고 있음 ①박신굴 또는 각부굴은 5℃이하에서 보관하고 있음 ②박신굴은 청결하고 위생적인 덮개가 있는 용기 등에 보관하고 있음 ③보관용기 및 포장은 청결한 위생적인 합성수지제 등으로서 2차오염이 없음

4. 포장기준

항 목	사 항	세 부 사 항	평 가	비 고
포장기준	제품에 접촉하는 포장요건 포장표시	①오염을 방지할 수 있는 위생적인 조건하에서 포장을 실시함 ②포장재의 보관방법이 적절하여 습기, 먼지 및 기타 오염물질에 오염될 가능성이 적음 ①제조일자의 표시가 있음 ②포장재의 표시사항중 국명 및 가공공장의 표시가 있음

○ 종합의견

- 평가득점 : 점검대상 항목       점중     점  적합(     % )

- 종합검토의견

※ 작성요령

1. 종합결과  : A.B.C 등급으로 구분하여 표시할 것

A등급 : 총점검대상항목의 80%이상인 경우를 적격업체

- 단 국립수산물품질관리원장이 지정한 필수항목은 모두 적격일 것

B등급 : 총점검대상항목의 79～70%이상인 경우를 보완 대상업체

- 점검결과 현재는 부적격업체이나 미비사항에 대하여 개보수 또는 보완하여 재점검시 적격으로 예상되는 업체

C등급 : 총점검대상항목의 70%미만인 경우를 부적격업체2. 평가 : 점검결과 평가난은 각 세부사항 내용에 대하여 적격시 1점, 부적격이면 0점으로 기재

2. 평가 : 점검결과 평가난은 각 세부사항 내용에 대하여 적격시 1점, 부적격이면 0점으로 기재

3. 종합의견

- 평가득점은 점검대상 항목을 점수화하여 적합항목을 점수로 기재

- 종합검토의견은 검사원이 점검, 확인 및 조사한 사항에 대하여 시설현황 및 미비점, 보완점 등을 보다 구체적이고 상세하게 기록하는 등 종합적인 평가의견을 기재

[별지 제3호서식]

생식용생굴가공업체실태조사서

조사년월일 :

조사자  직 급        성명       (인)

기 업 명			등록번호
소 재 지	본 사	Tel :
	공 장	Tel :
생 산 능 력		MT/년
기술자보유현황

○ 시설현황

총 부지면적(㎡)				공장 건평(㎡)
<건물> 재질 : 층수 : 연건평 : ㎡	구 분	개 소	면 적(㎡)		구 분
	사무실				처리장
	탈의실				준비실
	화장실				제빙실
	창 고				폐 수 처리장
	실험실

210mm×297mm (일반용지 60g/㎡(재활용품))

○ 주요기기 보유현황

공 장					실 험 실
기기명	수 량	규 격	능 력	구입년도	기기명	수 량	규 격	능 력	구입년도

○ 생산 및 수출현황

주요품종	생 산 실 적 (M/T)			수 출 실 적 (M/T)
	◦◦년	◦◦년	◦◦년(계획)	◦◦년	◦◦년	◦◦년(계획)
계
기 타

※ 실적은 당년을 포함한 과거 2개년간 실적

○ 구비서류 :   1. 공장 전경사진 1매 (126×89㎜)

2. 제품처리 광경사진 1매 (126×89㎜)

[별지 제4호서식]

해양수산부 제 호 생식용생굴가공시설등록증
등록인	① 성 명		② 주민등록번호
	③ 주 소
④ 공장의 명칭
⑤ 공장의 위치
⑥ 등록시설의 주 시설개요
생식용생굴대일수출요령에 의하여 위와 같이 등록증을 교부합니다. 년 월 일
국립수산물품질관리원장				인

210mm×297mm (일반용지 60g/㎡(재활용품)

[별지 제5호서식]

생식용생굴가공시설등록변경 (휴․폐업) 신고서								처 리 기 간
								7일
신 고 인	① 성 명				②주민등록번호
	③ 주 소			(전화번호 : )
④ 등록번호
⑤ 변경(신고)사항
⑥ 변경(신고)사유
생식용생굴대일수출요령에 의거 등록된 가공시설에 대하여 상기 사유로 변경(휴업, 폐업) 신고합니다. 년 월 일 신 고 인 (서명 또는 인) 국립수산물품질관리원장 귀하
구비서류									수수료
									없 음
없 음

210mm×297mm (일반용지 60g/㎡(재활용품)

[별지 제6호서식]

롯 트 관 리 기 록 표
채취관리	양식장등록번호					어 장 주 명
	채 취 품 명					관 리 자			(인)
	채 취 해 역					작 업 내 용
	채 취 년 월 일					포장재(수송용기)
	채취 관리번호
	채 취 수 량		1차: ㎏		2차: ㎏		3차: ㎏		4차: ㎏
	기 타 사 항
운반관리	회 수		1차			2차			3차
			출 발	도 착		출 발		도 착	출 발	도 착
	운 반 일 시
	장 소
	수 량
	수 송 수 단
	차 량 번 호
	관 리 자		(인)
가공 관리	구입또는 반입품명					수 량
	구입또는 반입장소					원료보관장소
	가 공	일 자				수 량			개 ㎏
		장 소				가 공 내 용
		보관장소				관 리 자			(인)
	제 품	일 자				포 장 재
		품 명				수 량			개 ㎏
	가공 관리번호					보 관 창 고
	기 타 사 항
수출 관리	수 출 회 사 명
	수 출 일 시					관 리 자			(인)
	품 명					수 량			개 ㎏
	수출관리롯트번호
	수 입 상 사 명					수출허가(승인)서번호
	운 반 일 시					운 반 장 소
	운 반 수 량		개 ㎏			수 송 수 단
	기 타 사 항
위의 내용을 확인합니다. 년 월 일 수출기업명 대 표 자 (서명 또는 인)

210mm×297mm (일반용지 60g/㎡(재활용품))

[별지 제7호서식]

NATIONAL FISHERY PRODUCTS QUALITY MANAGEMENT SERVICES MINISTRY OF OCEANS AND FISHERIES OF REPUBLIC OF KOREA CERTIFICATE OF CATCHING(PRODUCTING) AREA (原 産 地 證 明 書) Serial No : Date :
Export Company (輸出會社)
Name and Representative (會社名 및 代表者)
Address (輸出會社 住所)
Import Company (輸入會社)
Name and Representative (會社名 및 代表者)
Address (輸入會社 住所)
Contents of Certification
Commodity(品名)
Quantity (數量)
Lot Number of Export (輸出LOT番號)
Culture Area(Registered farm number) 生産海域(養殖場登錄番號)	號 海域(養殖場登錄番號: )
Processor(Registered number) 加工工場名(登錄番號)	(登錄番號: )
Date of Production (採取年月日)
Remark (備考)	P.S.P. 檢査結果 (適合, 不適合)
This is to certify that the above mentioned oyster is produced in the area approved by the Korea Government in reference to the standards and guidances of the Japanese & Korean Food Sanitation Law on raw oyster and Paralytic Shellfish Poisoning (PSP) Control. President of Oyster Director of Regional Office Hanging Culture NATIONAL FISHERY PRODUCTS Cooperative of Korea QUALITY MANAGEMENT SERVICES

210mm×297mm (일반용지 60g/㎡(재활용품)