의약품중 보존제 기준 및 시험방법

식품의약품안전청고시 제1998-130호(1998.12.31)

1. 적용범위

보존제시험법은 의약품 제제의 보존 중 품질의 기준을 확보하고, 그 유용성을 높이기 위한 목적으로 제제에 첨가되는 보존제를 확인 및 정량하는 시험법이다. 이 시험법은 파라옥시안식향산에스텔 및 그 염류, 안식향산 및 그 염류, 데히드로초산 및 그 염류, 소르빈산 및 그 염류, 벤질알코올, 클로로부탄올, 페놀, 염화벤잘코늄을 보존제로 함유하는 내복용액제, 안과용제, 주사제, 환제․캅셀제․정제등의 내복용고형제, 연고제, 크림제 등의 제제에 적용한다.

2. 기준

다음 시험법에 따라 시험할 때 보존제의 양은 표시향이하이어야 하고 필요하면 따로 정할 수 있다.

3. 시험방법

가. 확인시험

정량법의 검액에서 얻은 주피크의 유지시간은 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간과 같다.

나. 정량법

(1) 액체크로마토그래프법

(가) 파라옥시안식향산에스텔 및 그 염류, 안식향산 및 그 염류, 데히드로초산 및 그 염류, 소르빈산 및 그 염류, 벤질알콜올, 클로로부탄올, 페놀, 염화벤잘코늄

검 액 : 각 보존제의 표시량에 따라 적당량을 정확하게 취하여 메탄올을 넣어 각 보존제의 최종농도가 1mL중 10㎍이 되도록 만들어 여과하고 여액을 검액으로 한다. 다만, 연질캅셀제 등 액상이 아닌 제제는 온수를 넣고 흔들어 섞어 연질캅셀기제 등을 완전하게 녹인 다음 메탄올을 넣어 최종농도를 표준액과 같이 하여 여과하고 여액을 검액으로 하고, 시럽제 등 감미제(당류)가 다량 함유되어 있을 경우에는 고상추출법(solid phase extraction)등을 써서 되도록 당류를 제거한 다음 여과하고 여액을 검액으로 한다. 또한, 염화벤잘코늄은 메탄올 대신 이동상을 용매로 쓴다.

표준액 : 파라옥시안식향산에스텔 및 그 염류, 안식향산 및 그 염류, 데히드로초산 및 그 염류, 소르빈산 및 그 염류, 벤질알코올, 클로로부탄올, 페놀, 염화벤잘코늄 표준품 일정량을 정밀하게 달아 메탄올을 넣어 녹여 최종농도가 1mL 중 10㎍이 되도록 만들어 각각의 표준액으로 한다. 다만, 염화벤잘코늄은 메탄올 대신 이동상을 용매로 쓴다.

검액 및 표준액을 가지고 다음 조건으로 액체 크로마토그래프법에 따라 시험하여 각 보존제의 피크면적 AT 및 As를 구한다.

보존제의 양(mg) = 표준품의 양(mg) ×

다만, 염화벤잘코늄의 피크면적 AT및 As는 검액 및 표준액 중 염화벤잘코늄 피크면적의 합계면적으로 한다.

조작조건

1) 파라옥시안식향산에스텔 및 그 염류

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 254nm)

칼 럼 : 안지름 약 4mm, 길이 15~30cm인 스테인레스관에 5~10μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

이동상 : 아세토니트릴·물·빙초산 혼합액(55:44:1)

2) 안식향산 및 그 염류, 데히드로초산 및 그 염류

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 254 nm)

칼 럼 : 안지름 약 4nm, 길이 15~30cm인 스테인레스관에 5~10μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

이동상 : 0.01mol/L, 인산일수소암모늄의 메탄올·테트라히드로푸란·물 혼합액(225:60:715), 인산으로 pH 3.4로 조정한다.

3) 소르빈산 및 그 염류

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 254 nm)

칼럼 : 안지름 약 4mm, 길이 15~30cm인 스테인레스관에 5~10μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

이동상 : 0.01mol/L, 인산이수소암모늄의 아세토니트릴·물혼합액(35:65), 인산으로 pH 2.5로 조정한다.

4) 벤질알코올

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 254 nm)

칼 럼 : 안지름 약 4mm, 길이 15~30cm인 스테인레스관에 5~10μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

이동상 : 0.005mol/L, 1-옥탄설폰산나트륨의 메탄올·물·빙초산혼합액(20:79:1)

5) 클로로부탄올

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 214 nm)

칼 럼 : 안지름 약 4mm, 길이 15~30cm인 스테인레스관에 5~10μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

이동상 : 0.005mol/L, 1-핵산설폰산나트륨의 아세토니트릴·물혼합액(40:60), 인산으로 pH 3.0으로 조정한다.

6) 페놀

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 254 nm)

칼 럼 : 안지름 약 4mm, 길이 15~30cm인 스테인레스관에 5~10μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

이동상 : 메탄올·물혼합액(70:30)

7) 염화벤잘코늄

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 254 nm)

칼 럼 : 안지름 약 4mm, 길이 15~30cm인 스테인레스관에 5~10μm의 액체크로마토그래프용 니트릴화한 실리카겔을 충전한다.

이동상 : 아세토니트릴·1% 인산일수소나트륨액혼합액(50:50), 인산으로 pH 5.2로 조정한다.

(2) 가스크로마토그래프법

(가) 파라옥시안식향산에스텔 및 그 염류, 벤질알코올, 클로로부탄올 및 페놀 : USP 항균성물질시험법에 따른다.

(나) 안식향산 및 그 염류, 소르빈산 및 그 염류, 데히드로초산 및 그 염류 : 각 보존제의 표시량에 따라 5~10mg 해당량을 정밀하게 달아 필요하면 물 50ml를 넣어 가온하여 녹인 다음 염화나트륨 10g, 묽은 염산 5mL를 넣고 에텔 40mL, 30mL, 및 30mL씩으로 3회 추출한다. 에텔추출액을 모아 소량의 물로 씻고 에텔층을 따로 취한다, 에텔층은 무수황산나트륨을 써서 탈수시킨 다음 에텔을 날려보낸다. 잔류물을 내부표준액에 녹여 10mL로 하여 검액으로 한다, 따로 각 보존제 표준품 일정량을 정밀하게 달아 검액과 같은 방법으로 조작하여 내부표준액에 녹여 1ml중 0.5~1mg을 함유하는 용액으로 만들어 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 다음 조건으로 가스크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 각 보존제의 피크면적비 QT 및 Qs를 구한다.

보존제의 양(mg) = 표준품의 양(mg) ×

o 내부표준액 : 아세트아닐리드의 아세톤용액(1→1,000)

조작조건

검출기 : 수소염이온화검출기

칼럼 : ①안지름 약 3mm, 길이 약 2m 스테인레스관에 가스크로마토그래프용 디에칠렌글리콜호박산에스텔 2~5% 및 인산 1%의 비율로 60~80 메쉬의 크로모솔브 W에 피복시킨 것을 충전한다.

② 안지름 약 3mm, 길이 약 2m 스테인레스관에 가스크로마토그래프용 네오펜틸글리콜호박산에스텔 10% 및 인산 1%의 비율로 60~80메쉬의 크로모솔브 W에 피복시킨 것을 충전한다.

주입부온도 : 210~230℃의 일정온도

칼럼온도: 140~200℃의 일정온도

검출기온도 : 230~250℃의 일정온도

캐리어가스 : 질소

유량 : 60mL/분

부   칙

①(시행일) 이 고시는 고시한 날부터 시행한다.

②(경과조치) 이 고시 시행 당시 검사중인 의약품은 이 고시를 적용한다.